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名稱Hs 578T(人乳腺癌細胞)(STR鑒定正確)

別稱HS 578T;Hs-578T;HS-578T;Hs_578t;Hs-578-T;HS-578-T;Hs 578.T;HS578T;Hs578T;Hs578t;HS0578T;578T;HS578;Hs578;Homo sapiens No.578,tumor cells

種屬人

年齡（性別）女；74歲

組織來源乳腺癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述Hs 578T細胞源自乳房癌，它與正常成纖維細胞樣細胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細胞**初是多角形的，但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細胞形態(tài)。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，Hs 578T細胞內酪蛋白顆粒聚集、橋粒緊密連接、脂質體和光滑內質網(wǎng)小泡。Hs 578T細胞與Hs 578Bst細胞一樣，未檢測到雌激素受體和內生病毒。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM＋0.01mg/ml Insulin＋10%FBS＋1%P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~36-54 hours

凍存條件凍存液：55%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

致瘤性No,in immunosuppressed mice.Yes,in semisolid medium.

保藏機構ATCC;CRL-7849 ATCC;HTB-126 BCRC;60120 DSMZ;ACC-781 ECACC;86082104

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備DMEM培養(yǎng)基；北美胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml牛胰島素；雙抗，1%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。